2016年1月
第五卷第1期
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文章编程 2016年2月
全肥鼠眼山从视物剖面到视物组织新方法
秀英金 ; 珠塔邦Assawachanant
作者关联注解
  • 秀英金
    Neuriology-Nerode
  • 珠塔邦Assawachanant
    Neuriology-Nerode
  • 通信号 :md21231美国巴尔的摩约翰霍普金斯医学院南医中心Ophthalmlogy电子邮件: skm370@jh.ed
翻译视觉科技 2016年2月5卷6.多伊:https://doi.org/10.1167/tvst.5.1.6
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      金秀文Assawachanant全肥鼠眼山从视物剖面到视物组织新方法转接维斯科学文献技术师2016年;5(1):6多伊:https://doi.org/10.1167/tvst.5.1.6.

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      ARVO(1962-2015)作者群(2016-present)

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抽象性

目标:远视色素上皮层和光受体外段直角相间子层对老化和变异性病理生成很重要,但当前协议不提供全全横向图像开发RPE/retina整片染色协议以观察集分区域

方法论:RPE/retina整座机被染色而不是分离视网膜或RPE整座机过氧化氢2O级2处理方法应用条件不等,集中度、时间和温度对RPE和染色色圈色素进行漂白处理

结果:RPE/retina整列染色协议比全列提供光受体外段的更好形态学画眼10%H2O级2预处理有效漂白melanin小于2小时或4C小于7天,对大多数抗体测试的免疫标签效果不产生显著效果与非损耗控制相比,55摄氏度漂白提高免疫标签强度ilanin漂白RPE/retina协议被进一步应用到CX3CR+/GFP视网膜从sclera扩展至外部双形层

结论:颜色漂白RPE/retina整顶允许合机对光接收器层分横向成像,而用离散视网膜或RPE整顶现有方法无法实现根据这些程序,大多数抗体的抗原性也得到了很好的保存

翻译相关性:高效协议提供工具观察子系结构综合视图,包括大型/微型细胞和移植细胞,并允许进一步研究类固和光接收器在老化、疾病和视离子变换模型中的相互关系

导 言
子线性空间,即光受体外段和apical视色上下文之间的区域对光受体和RPE之间的功能关系至关重要视网膜组织与cleroroid/RPE分离,视网膜和RPE两侧用于下文整列染色程序 微博1A)因此,我们开发出一种新的技术 允许成像 完全三维(3D)形态 RPE/Retina全机
图1
图显示全机当前协议和新色化法RPE/retina整机观察完整子关系空间伟德国际官网网址在当前协议中,整堆染色用RPE和视网膜分解组织进行,损害RPE和视网膜之间的子关系区(红X表示红Xs)。面膜漂白程序应用到全球或后球以观察完好的子脉冲区域
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图显示全机当前协议和新色化法RPE/retina整机观察完整子关系空间伟德国际官网网址在当前协议中,整堆染色用RPE和视网膜分离组织执行,损害子脉冲区域 红色Xs)RPE和视网膜间面膜漂白程序应用到全球或后球以观察完好的子脉冲区域
图1
图显示全机当前协议和新色化法RPE/retina整机观察完整子关系空间伟德国际官网网址在当前协议中,整堆染色用RPE和视网膜分离组织执行,损害子脉冲区域 红色Xs)RPE和视网膜间面膜漂白程序应用到全球或后球以观察完好的子脉冲区域
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子关系空间成像对理解免疫功能和视觉化移植细胞整合视网膜非常重要举个例子,老化变异性疾病条件影响子系空间的健康功能并干扰其构件结构具体地说,视网膜微lia和/或大字从外双形层和类固船分别迁移到视网膜炎症区 一号,2子移植治疗细胞融入宿主视网膜 3,4因此,宜保留RPE和视网膜组织之间的分量值,同时映射结构
最近,CLARITY神经组织成像开发并仍在优化,视组织类型而定,以增加完整生物图像采集深度并改进反体染色应用 5,6CLARITY技术易应用全RPE/estina组织成像成年鼠眼小于150m总厚度,包括clerocroid、RPE和视网膜眼组织限制RPE/retina全成像的主要问题之一是RPE和choroid中存在色素细胞阻碍光传播伟德国际官网网址研究中,我们先评估光受体外段可能的图像采集过程,从RPE/retina全山使用非尖锐眼,并用全RPE/retina组织对介质漂白程序作进一步修改(全RPE/retina组织)( 微博1B帮助从RPE获取完整的视网膜组织到色素双眼内部视网膜组织
方法论
组织处理和IMMUNETHET
野型CD1、C57BL/6J和CX3CR1+/GFP 2鼠标使用所有研究都坚持ARVO词学和视觉研究使用动物声明并获得国家眼科院动物护理使用委员会批准整山色色色漂白和免疫性,鼠眼割裂,固定在4%假冒PBS30分至4小时,前端段在梅兰因漂白前后消除整架染色化初级和二级抗体分别在4摄氏3天和2天处理伟德国际官网网址10微米冷冻视网膜组织初级和二级抗体在室温下分别处理1.5小时和30分原生抗体使用兔子抗科内抓取Millipore,Billerica,MA)calbindin西格玛-阿尔德里奇Louis,MO)和离子绑定分子1华科公司、里士满公司、VA公司、鸡反Sopsin公司和绿色荧光蛋白Millipore, 鼠标反CD11b(Serotec,Oxord,England,UK),鼠标抗甘胺合成酶Millipore和ezrin(热科学,RockfordIL)相关二级抗体与Alexa Fluor488或555(LifeTechnology,Carlsbad,CA)并用虹膜血清相簿(1%)和0.2%或0.5%Triton X-100用于阻塞和抗体处理所有实验均用多视网膜分别重复至少两次
悬浮滑动
伟德国际官网网址RPE/restia全组织安装在玻璃滑动板上,并用单片对接封页,并用视网膜整列与光受体层对接覆盖页
组织Melianbleaching
过氧化氢 2O级 2)方法 7scrocroid/RPE/retina全色眼组织应用梅林漂白第一,整眼修复,角膜和透镜在H前后清除 2O级 2漂白3或10%H 2O级 2PBS解析法在55摄氏度测试30分至2.5小时,4摄氏度测试数日
显微镜
specimen幻灯片用Zeiss 700组合显微镜图像化(CarlZeiss Meditec,Jena,德国)。0.5或1m厚度捕获Z栈图片3D图像使用Volcity软件重建(Perkin-Elmer、Waltham和MA)。
结果
RPE/Retina全山非抓取鼠眼映射
非启发式CD1鼠标视线(1个月)首次测试使用RPE/retina整台染色光受体外段图片比对RPE/retina整座和分离视网膜整座(RPE/retina整座和视网膜整座)( 金字塔2, 3)显示光受体外段与CAR抗体完整分布式比全视网膜分布式强光受体外段插图RPE/retina全机3D显示锐端 微博2A三维重构视网膜全山外段 微博2B)水平Z图像还显示光受体外段锐端 微博3)
图2
光受体外段比较3D重建RPE/ retina全机或全机视网膜,CD1 albino鼠标满一个月的CD1鼠眼([A]RPE/retina,[B]视网膜)染上CAR(绿色)全山封装图像使用Volcity软件重构3D(z厚度,0.5微米)。
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光受体外段比较3D重建RPE/ retina全机或全机视网膜,CD1 albino鼠标满一个月的CD1鼠眼机([A]RPE/retina,[B]视网膜机)为CAR染色 绿化)全山封装图像使用Volcity软件重构3D(z厚度,0.5微米)。
图2
光受体外段比较3D重建RPE/ retina全机或全机视网膜,CD1 albino鼠标满一个月的CD1鼠眼机([A]RPE/retina,[B]视网膜机)为CAR染色 绿化)全山封装图像使用Volcity软件重构3D(z厚度,0.5微米)。
光受体外段比较3D重建RPE/ retina全机或全机视网膜,CD1 albino鼠标满一个月的CD1鼠眼([A]RPE/retina,[B]视网膜)染上CAR(绿色)全山封装图像使用Volcity软件重构3D(z厚度,0.5微米)。
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图3
光受体外段横向图像对比RPE/retina全机和CD1 albino鼠标视线全机组合z图片取自全机/视网膜全机(底部),显示向RPE取取1m厚度间距比例栏:10微米
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光受体外段横向图像对比RPE/retina全机和CD1 albino鼠标视线全机封装z图片取自RPE/retina全机 顶部并视线全机 底部显示1m厚度间距 尺度栏:10微米
图3
光受体外段横向图像对比RPE/retina全机和CD1 albino鼠标视线全机封装z图片取自RPE/retina全机 顶部并视线全机 底部显示1m厚度间距 尺度栏:10微米
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RPE/Retina全山画像
RPE/retina全机C57BL/6J鼠标眼睛免疫 2O级 2漂白化 金字塔4, 5)伟德国际官网网址melain漂白 RPE/scrocroid组织依赖H 2O级 2集中度 微博4A和处理时间 金字塔4B, 四维)10%H处理 2O级 2伟德国际官网网址55摄氏度显示1.5小时内使用RPE/retina全组织(RPE/re 金字塔4B, 四维和全目 微博4C)4°CH后7天全眼显示相似白化 2O级 2并处理 金字塔4C, 4E)
图4
优化melanin漂白条件c57BL/6J画鼠眼2.5小时55摄氏度时不同H2O2浓度效果(3%或10%)。差处理时间(0.5、1.0或1.5小时)对55摄氏度10%H2O2漂白效果4°C和55°CH2O2全眼漂白d55摄氏10%H2O2从C57BL/6J双目显示全RPE/retina4°CH2O2从C57BL/6J鼠标脱色全RPE/retina
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优化melanin漂白条件c57BL/6J画鼠眼A 不同H效果 2O级 2浓度(3%或10%)55摄氏度2.5小时偏差时间(0.5、1.0或1.5小时)对10%H 2O级 255摄氏度漂白4摄氏度和55摄氏度 2O级 2整眼白化(D)55摄氏10% 2O级 2脱色全RPE/retina从C57BL/6J双目显示在不同处理时间4°CH 2O级 2从鼠标C57BL/6J中漂白整片RPE/retina
图4
优化melanin漂白条件c57BL/6J画鼠眼A 不同H效果 2O级 2浓度(3%或10%)55摄氏度2.5小时偏差时间(0.5、1.0或1.5小时)对10%H 2O级 255摄氏度漂白4摄氏度和55摄氏度 2O级 2整眼白化(D)55摄氏10% 2O级 2脱色全RPE/retina从C57BL/6J双目显示在不同处理时间4°CH 2O级 2从鼠标C57BL/6J中漂白整片RPE/retina
优化melanin漂白条件c57BL/6J画鼠眼2.5小时55摄氏度时不同H2O2浓度效果(3%或10%)。差处理时间(0.5、1.0或1.5小时)对55摄氏度10%H2O2漂白效果4°C和55°CH2O2全眼漂白d55摄氏10%H2O2从C57BL/6J双目显示全RPE/retina4°CH2O2从C57BL/6J鼠标脱色全RPE/retina
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图5
使用漂白C57BL/6JRPE/retina全机封装图像10%和3%H2O2漂白RPE/Retina全机使用Volity软件重建3D图像以同样方式获取并调整
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使用漂白C57BL/6JRPE/retina全机封装图片10%和3%H 2O级 2漂白RPE/retina全机3D使用Volity软件重构图像以同样方式获取并调整
图5
使用漂白C57BL/6JRPE/retina全机封装图片10%和3%H 2O级 2漂白RPE/retina全机3D使用Volity软件重构图像以同样方式获取并调整
使用漂白C57BL/6JRPE/retina全机封装图像10%和3%H2O2漂白RPE/Retina全机使用Volity软件重建3D图像以同样方式获取并调整
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10%H处理 2O级 2CAR和S-opsin强免疫从合金到光接收器层,而H值为3% 2O级 2相同获取条件下相联成像处理(2.5小时)( 微博5)下项实验研究 10%H 2O级 2应用55摄氏1.5小时或4摄氏7天处理然而H类 2O级 2处理和组织固定时间应当根据染色法、色素和子因条件优化,视物种、年龄和病理状态而异。
伟德国际官网网址Immno标签破解和无破解视点组织强度比较
虽预期H 2O级 2处理不会伤害免疫史化学过程的抗原性 7伟德国际官网网址我们比较了漂白无损视网膜组织中数个抗体的免疫强度 微博6)s-opsin抗体用标签表示卷发光受体外段、calbindin和prod双极细胞外段,GS表示mullerglia,egrin表示spical微Villi,Iba-1和CD11b表示miclia多数测试抗体在55摄氏漂白视网膜比无损视网膜亮度变色法变暖条件被认为具有抗原检索效果,因为4°C变色视网膜没有显示比无损视网膜强度(未显示)。CD11b免疫性被取消内生GFP信号在10%H完全消除 2O级 2漂白组织
图6
抗体标签强度比较 无损和漂白垂直切分式反体染色原状55°C10%H2O2漂白(1.5小时)垂直视网膜第一和第二抗体在室温下分别处理1.5小时和0.5小时比例栏:20微米
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抗体标签强度比较 无损和漂白垂直切分式反体完全染色55°C10%H 2O级 2漂白式(1.5小时)冷冻垂直视网膜第一和第二抗体在室温下分别处理1.5小时和0.5小时 尺度栏20微米
图6
抗体标签强度比较 无损和漂白垂直切分式反体完全染色55°C10%H 2O级 2漂白式(1.5小时)冷冻垂直视网膜第一和第二抗体在室温下分别处理1.5小时和0.5小时 尺度栏20微米
抗体标签强度比较 无损和漂白垂直切分式反体染色原状55°C10%H2O2漂白(1.5小时)垂直视网膜第一和第二抗体在室温下分别处理1.5小时和0.5小时比例栏:20微米
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machrophage/Microglia从clerocroid转OPL
scrocroid2个月CX3CR1+/GFP带C57BL/6J背景鼠观察确认成功应用10%H 2O级 255摄氏1.5小时预处理或4摄氏7天预处理GFP类阳性宏图分层、光接收器内段层相近微lia伪数组和OPL中甚至微数组都见于色化RPE/restia全机中 微博7)
图7
GFP细胞从clerocroid扩展至OCLCR+/GFP鼠标视网膜从crocroid到OPL视网膜的封装图像使用Volcity软件重建成三维视图RPE/retina全机2个月CX3CR1+/GFP小鼠经55C预处理10%H2O2后受GFP抗体免疫1.5小时或4C7天代表图像取自55°CH2O2预处理左倾视图右面更好地显示水平平面clerocroid原创组合图像共从1190z栈图片中取出58cR+/GFP宏数/croidiglia、IS和OPL单片IS/OS内外部分光受体比例栏:20微米
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GFP细胞从clerocroid扩展至OCLCR+/GFP鼠标视网膜从crocroid到OPL视网膜的封装图像使用Volcity软件重建成三维视图RPE/retina全机2个月CX3CR1+/GFP小鼠在10%H后使用GFP抗体免疫 2O级 255摄氏度1.5小时或4摄氏度7天预处理代表图像取自55摄氏度 2O级 2预处理 左转倾斜视图 右面板以更好地显示水平平面sclerocroid原创组合图像共从1190z栈图片中取出58cR+/GFP宏数/croidiglia、IS和OPL单片IS/OS内外部分光受体 尺度栏20微米
图7
GFP细胞从clerocroid扩展至OCLCR+/GFP鼠标视网膜从crocroid到OPL视网膜的封装图像使用Volcity软件重建成三维视图RPE/retina全机2个月CX3CR1+/GFP小鼠在10%H后使用GFP抗体免疫 2O级 255摄氏度1.5小时或4摄氏度7天预处理代表图像取自55摄氏度 2O级 2预处理 左转倾斜视图 右面板以更好地显示水平平面sclerocroid原创组合图像共从1190z栈图片中取出58cR+/GFP宏数/croidiglia、IS和OPL单片IS/OS内外部分光受体 尺度栏20微米
GFP细胞从clerocroid扩展至OCLCR+/GFP鼠标视网膜从crocroid到OPL视网膜的封装图像使用Volcity软件重建成三维视图RPE/retina全机2个月CX3CR1+/GFP小鼠经55C预处理10%H2O2后受GFP抗体免疫1.5小时或4C7天代表图像取自55°CH2O2预处理左倾视图右面更好地显示水平平面clerocroid原创组合图像共从1190z栈图片中取出58cR+/GFP宏数/croidiglia、IS和OPL单片IS/OS内外部分光受体比例栏:20微米
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讨论
在这次研究中,我们报告使用过氧化氢预处理法成功改制成像法RPE/retina整座山染色简单高效协议让我们观察3D视网膜结构从合金到相片受体层, 并让我们理解合金和相片受体之间的关系 因为我们不再分离clerocroid/RPE和视网膜
H级 2O级 2预处理产生全RPE/resti 2O级 2malanin漂白协议安全快捷H级 2O级 2薄膜漂白展览或好或好,对大多数免疫素保持强度,但没有检测到CD11b信号,即薄膜蛋白H类 2O级 2偏白化处理似乎会影响和/或摧毁细胞表面顶部,正如内生过氧化物活动阻塞过程已经报告的那样。 8值得注意的是,H后GFP免疫性保持 2O级 2Ilanin漂白处理,尽管本地GFP信号消失伟德国际官网网址视使用组织与抗体而定,防疫可能需要谨慎优化
色化RPE/retina全挂式协议报告将有助于加深理解疾病变换如何影响子系区域,并允许观察3D背景的治疗子系移植细胞,介于picalRPE和视网膜外段层AH级 2O级 2预处理还可用于单独观察和/或RPE以及整视网膜纹眼重要的是,协议可适应最近开发的CLARITY技术 5全目扫描从顶部clerocroid到视网膜组织底部
感知感知
作者感谢Robert N.法里斯斯斯瓦鲁普咨询支持WeiWongCX3XR1-GFP视网膜编辑GailSeabold手稿编辑
得到国家眼院内研究方案支持
披露: S.Y.金无J大全 .阿萨瓦chanant,无
引用
KimSY、YangHJ、长YS等小鼠删除aryl碳氢受体AHR导致微lia和RPE萎缩子存储 投注Ophthalm.2014年55:6031-6040
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EberleD库思TTSantos-FerreiraTVJ外段移植光受体先质细胞 PloS一号.2012年7:e46305
Gonzalez-Corde受光器前兆出自三维胚胎干细胞培养集成并成熟于成人变形视网膜 Nat生物理工.2013年31:741-747
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PoguzhelskayaE,ArtamonovD,BolshakovaA,VlasovaO,Bezprezvannyii简单化CLARITY成像法 莫神经元.2014年九点十九分
MomoseMOTAHHHH重评价米林漂白使用热稀释过氧化氢进行组织病理分析 路径Int.2011年61:345-350
ChengTM、MaoSJ、LaiST等血红素诱导氧化压力与内生过氧化物活度和多饱和脂肪酸H2O2生成相关 自由拉迪斯.2011!45:303-316
图1
图显示全机当前协议和新色化法RPE/retina整机观察完整子关系空间伟德国际官网网址在当前协议中,整堆染色用RPE和视网膜分解组织进行,损害RPE和视网膜之间的子关系区(红X表示红Xs)。面膜漂白程序应用到全球或后球以观察完好的子脉冲区域
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图显示全机当前协议和新色化法RPE/retina整机观察完整子关系空间伟德国际官网网址在当前协议中,整堆染色用RPE和视网膜分离组织执行,损害子脉冲区域 红色Xs)RPE和视网膜间面膜漂白程序应用到全球或后球以观察完好的子脉冲区域
图1
图显示全机当前协议和新色化法RPE/retina整机观察完整子关系空间伟德国际官网网址在当前协议中,整堆染色用RPE和视网膜分离组织执行,损害子脉冲区域 红色Xs)RPE和视网膜间面膜漂白程序应用到全球或后球以观察完好的子脉冲区域
图显示全机当前协议和新色化法RPE/retina整机观察完整子关系空间伟德国际官网网址在当前协议中,整堆染色用RPE和视网膜分解组织进行,损害RPE和视网膜之间的子关系区(红X表示红Xs)。面膜漂白程序应用到全球或后球以观察完好的子脉冲区域
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图2
光受体外段比较3D重建RPE/ retina全机或全机视网膜,CD1 albino鼠标满一个月的CD1鼠眼([A]RPE/retina,[B]视网膜)染上CAR(绿色)全山封装图像使用Volcity软件重构3D(z厚度,0.5微米)。
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光受体外段比较3D重建RPE/ retina全机或全机视网膜,CD1 albino鼠标满一个月的CD1鼠眼机([A]RPE/retina,[B]视网膜机)为CAR染色 绿化)全山封装图像使用Volcity软件重构3D(z厚度,0.5微米)。
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光受体外段比较3D重建RPE/ retina全机或全机视网膜,CD1 albino鼠标满一个月的CD1鼠眼([A]RPE/retina,[B]视网膜)染上CAR(绿色)全山封装图像使用Volcity软件重构3D(z厚度,0.5微米)。
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图3
光受体外段横向图像对比RPE/retina全机和CD1 albino鼠标视线全机组合z图片取自全机/视网膜全机(底部),显示向RPE取取1m厚度间距比例栏:10微米
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光受体外段横向图像对比RPE/retina全机和CD1 albino鼠标视线全机封装z图片取自RPE/retina全机 顶部并视线全机 底部显示1m厚度间距 尺度栏:10微米
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图4
优化melanin漂白条件c57BL/6J画鼠眼2.5小时55摄氏度时不同H2O2浓度效果(3%或10%)。差处理时间(0.5、1.0或1.5小时)对55摄氏度10%H2O2漂白效果4°C和55°CH2O2全眼漂白d55摄氏10%H2O2从C57BL/6J双目显示全RPE/retina4°CH2O2从C57BL/6J鼠标脱色全RPE/retina
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优化melanin漂白条件c57BL/6J画鼠眼A 不同H效果 2O级 2浓度(3%或10%)55摄氏度2.5小时偏差时间(0.5、1.0或1.5小时)对10%H 2O级 255摄氏度漂白4摄氏度和55摄氏度 2O级 2整眼白化(D)55摄氏10% 2O级 2脱色全RPE/retina从C57BL/6J双目显示在不同处理时间4°CH 2O级 2从鼠标C57BL/6J中漂白整片RPE/retina
图4
优化melanin漂白条件c57BL/6J画鼠眼A 不同H效果 2O级 2浓度(3%或10%)55摄氏度2.5小时偏差时间(0.5、1.0或1.5小时)对10%H 2O级 255摄氏度漂白4摄氏度和55摄氏度 2O级 2整眼白化(D)55摄氏10% 2O级 2脱色全RPE/retina从C57BL/6J双目显示在不同处理时间4°CH 2O级 2从鼠标C57BL/6J中漂白整片RPE/retina
优化melanin漂白条件c57BL/6J画鼠眼2.5小时55摄氏度时不同H2O2浓度效果(3%或10%)。差处理时间(0.5、1.0或1.5小时)对55摄氏度10%H2O2漂白效果4°C和55°CH2O2全眼漂白d55摄氏10%H2O2从C57BL/6J双目显示全RPE/retina4°CH2O2从C57BL/6J鼠标脱色全RPE/retina
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图5
使用漂白C57BL/6JRPE/retina全机封装图像10%和3%H2O2漂白RPE/Retina全机使用Volity软件重建3D图像以同样方式获取并调整
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使用漂白C57BL/6JRPE/retina全机封装图片10%和3%H 2O级 2漂白RPE/retina全机3D使用Volity软件重构图像以同样方式获取并调整
图5
使用漂白C57BL/6JRPE/retina全机封装图片10%和3%H 2O级 2漂白RPE/retina全机3D使用Volity软件重构图像以同样方式获取并调整
使用漂白C57BL/6JRPE/retina全机封装图像10%和3%H2O2漂白RPE/Retina全机使用Volity软件重建3D图像以同样方式获取并调整
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图6
抗体标签强度比较 无损和漂白垂直切分式反体染色原状55°C10%H2O2漂白(1.5小时)垂直视网膜第一和第二抗体在室温下分别处理1.5小时和0.5小时比例栏:20微米
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抗体标签强度比较 无损和漂白垂直切分式反体完全染色55°C10%H 2O级 2漂白式(1.5小时)冷冻垂直视网膜第一和第二抗体在室温下分别处理1.5小时和0.5小时 尺度栏20微米
图6
抗体标签强度比较 无损和漂白垂直切分式反体完全染色55°C10%H 2O级 2漂白式(1.5小时)冷冻垂直视网膜第一和第二抗体在室温下分别处理1.5小时和0.5小时 尺度栏20微米
抗体标签强度比较 无损和漂白垂直切分式反体染色原状55°C10%H2O2漂白(1.5小时)垂直视网膜第一和第二抗体在室温下分别处理1.5小时和0.5小时比例栏:20微米
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图7
GFP细胞从clerocroid扩展至OCLCR+/GFP鼠标视网膜从crocroid到OPL视网膜的封装图像使用Volcity软件重建成三维视图RPE/retina全机2个月CX3CR1+/GFP小鼠经55C预处理10%H2O2后受GFP抗体免疫1.5小时或4C7天代表图像取自55°CH2O2预处理左倾视图右面更好地显示水平平面clerocroid原创组合图像共从1190z栈图片中取出58cR+/GFP宏数/croidiglia、IS和OPL单片IS/OS内外部分光受体比例栏:20微米
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GFP细胞从clerocroid扩展至OCLCR+/GFP鼠标视网膜从crocroid到OPL视网膜的封装图像使用Volcity软件重建成三维视图RPE/retina全机2个月CX3CR1+/GFP小鼠在10%H后使用GFP抗体免疫 2O级 255摄氏度1.5小时或4摄氏度7天预处理代表图像取自55摄氏度 2O级 2预处理 左转倾斜视图 右面板以更好地显示水平平面sclerocroid原创组合图像共从1190z栈图片中取出58cR+/GFP宏数/croidiglia、IS和OPL单片IS/OS内外部分光受体 尺度栏20微米
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GFP细胞从clerocroid扩展至OCLCR+/GFP鼠标视网膜从crocroid到OPL视网膜的封装图像使用Volcity软件重建成三维视图RPE/retina全机2个月CX3CR1+/GFP小鼠在10%H后使用GFP抗体免疫 2O级 255摄氏度1.5小时或4摄氏度7天预处理代表图像取自55摄氏度 2O级 2预处理 左转倾斜视图 右面板以更好地显示水平平面sclerocroid原创组合图像共从1190z栈图片中取出58cR+/GFP宏数/croidiglia、IS和OPL单片IS/OS内外部分光受体 尺度栏20微米
GFP细胞从clerocroid扩展至OCLCR+/GFP鼠标视网膜从crocroid到OPL视网膜的封装图像使用Volcity软件重建成三维视图RPE/retina全机2个月CX3CR1+/GFP小鼠经55C预处理10%H2O2后受GFP抗体免疫1.5小时或4C7天代表图像取自55°CH2O2预处理左倾视图右面更好地显示水平平面clerocroid原创组合图像共从1190z栈图片中取出58cR+/GFP宏数/croidiglia、IS和OPL单片IS/OS内外部分光受体比例栏:20微米
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