2016年5月
第五卷3
开放存取
文章编程 2016年5月
橙色纹理覆盖小机器人梅拉诺马斯
作者关联注解
  • 玛利亚D加西亚州
    Mayo医学院系,Mayo诊所,罗切斯特州MN
  • 迪瓦R沙洛马
    解剖病理学系,Mayo诊所
  • 艾伦D马尔默斯坦
    Ophalmlogy研究系maio诊所 Rochester
  • JoseS.浦里多
    Ophalmlogy系,Mayo诊所,罗彻斯特州MN
    分子医学系maio诊所
  • 通信号 :JoseSPulidomao诊所Ophalmlogy系和分子医学系,200第一街SWW,Rochester,MN55905电子邮件: pulido.jose@mayo.edu
翻译视觉科技 2016年5月5卷4.多伊:https://doi.org/10.1167/tvst.5.3.4
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      玛利亚D加西亚市Salomao,AlanD马尔默斯坦 JoseS浦路多橙色肥料覆盖小机器人梅拉诺马斯转接维斯科学文献技术师2016年;5(3):4多伊:https://doi.org/10.1167/tvst.5.3.4.

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      ARVO(1962-2015)作者群(2016-present)

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抽象性

目标:橙色色素是脑肿瘤恶性的重要标志问题在于色素积分是宏图或视网膜上皮细胞内部调查哪些细胞与颜色变换相关

方法论:检测二位病人的切片标本 染色体和稠橙色素色基和Fundus自流照片审查后,再用荧光显微镜、电子显微镜和切除眼睛免疫史化学检验橙色

结果:橙色色画像显示色基摄像 并关联FAF高显光度荧光显微镜剖面显示RPE自敏度,当RPE有局部视波分治和反应超增时最显眼Imnohito化学研究使用Keratin和S-100染色RPE细胞,这些细胞仍然附着Bruch膜离散视网膜中直系细胞与反CD163反体染色,没有显出自敏性电显微分析显示聚类RPE细胞中存在lipsuscin和melanolipofscin

结论:染色色素混合损伤发源于RPE细胞,而非大型字类,在RPE扩散的地方最富

翻译相关性:橙色肿瘤生物标志产生并存在于视网膜上皮

导 言
最常见的初级内核肿瘤为染色体膜瘤,患上这种肿瘤的病人未来10年死亡率约为50%。 一号虽经临床观察橙色素覆盖染色体间损耗是恶卓染色体的重要标志, 产橙色色素的细胞未知 2
橙色色素曾被一位作者显示为自爆发性 3其他人证实了这一发现 4-6Lipofscin用解析词描述黄褐色粒子,这些粒子可随年龄或疾病积聚在细胞中视网膜上皮细胞中,与年龄相联的唇膜粒子含有脂质、蛋白质和视网膜衍生物,包括N-retinyl-N-retinide乙醇 7假设唇阴素是视网膜光受体外段氧化分解的副产品,视网膜衍生物是唇阴素自爆的主要推理者 8-11此外,嘴语素积聚表示异常解析机制导致视网膜分子不完全分解利波素素积分与数种眼科疾病相关联,例如与年龄有关的畸形Stargardt病类和croid嘴唇硬化作用除外,唇片积累作为驱动疾病状态或预测指标的意义值得怀疑。 12-17
橙色涂料覆盖染色体,但我们对橙色涂料细胞子细胞定位的了解有限 6,18号,19号伟德国际官网网址结果是,很难评估橙色可如何促进染色体学和相邻视网膜组织变换橙色色素同染色素患者视网膜变换关联性,橙色染色素与染色素黑素瘤相联性定位为opliofscin和melalioposcin粒子,RPE细胞覆盖肿瘤
方法论
获Mayo诊所机构评审局批准后,我们审核了两位染色体病人的记录,他们在MN罗切斯特Mayo诊所接受剖析我们的研究符合赫尔辛基宣言
两位病人都接受全视检查,包括剖面视觉敏捷性、割片生物显微镜学、内压学和Funduscopy此外,还获取光一致性断层照相机、彩金图片机和自流照片机Fundelberg自流镜系统获取相片希德尔贝格工程公司Dossenhei机内自流光因使用argon蓝波长(488纳米)而振奋检测颜色Fundus和自流相片 分别显示橙色色素和自通
割裂双眼至少固定48小时 缓冲正文10%固化后,这些眼睛接受检验、照相和分割,并按指南使用虚膜膜检查剖面眼睛 20码双目剖面编译并提交历史整理并染色H&E和PAS定期酸-Schiff供后续显微检验
额外段由橙色色与自流照片比较富含使用荧光显微镜对几片无染段进行自爆双叶素高集中区位置评价选择组织段染上免疫史化学 表1)反体CD68和CD163用于识别宏抗体S-100和cytokeratin:keratin7、CAM5.2(ketin7和8)、AE1/AE3(ketin1-8、10、14-16和19)和OSCARKeratin
表1
immunioto化学研究使用原生抗体
表1
immunioto化学研究使用原生抗体
immunioto化学研究使用原生抗体
无染组织段自爆薄膜素选择并标注电子显微镜评估10微米合成组织段置入玻璃滑动无染段分解法将滑动点放入保暖xylene60分钟幻灯片在60摄氏度转至绝对乙醇30分钟后,乙醇浓度下降至60%幻灯片隔夜固定(1.0M磷酸缓冲pH7/2) 21号滑动为30分钟,三次修改0.1M磷酸缓冲pH7.2,后加1小时后缀蒸馏水三次稀疏30分钟后,组织团装有2%uranyl乙酸嵌入式染色后,组织分三大变换蒸水脱水,乙醇和百分百二氧化丙酸渐增富集化并嵌入Sprer树脂 22号薄度(90纳米)切除LeicaUC6超微数组(Leica,Wetzlar,德国),安装在200网状铜网格上并染上铅文JEOL1400+传输电子显微镜上摄取显微镜(JEOLUSA公司WatfordVA)操作80KV
结果
两位选择为染色体封存的病人被列入研究范围病人一号系50岁人,右眼旁有扩散渗透式后台染色体颜色Fundus摄影显示橙色染色 微博1a)此外,FAF成像显示这种色素的自发性,表示有opliophuscin 微博1b)
图1
颜色fundus照片(a,c)和FAF照片(b,d)图像(ab)取自病人1右眼肿瘤定位推理 箭头显示图像(a)上橙色色 箭头FAF图像(b)显示自敏度提高,这与用颜色Fundus摄像观察橙色的位置相关图像(c,d)取自2号病人左眼肿瘤定位超时 箭头点橙色色素c并增加自敏度d,结果与图像a和b相似
图1
颜色fundus照片(a,c)和FAF照片(b,d)图像(ab)取自病人1右眼肿瘤定位推理 箭头显示图像(a)上橙色色 箭头FAF图像(b)显示自敏度提高,这与用颜色Fundus摄像观察橙色的位置相关图像(c,d)取自2号病人左眼肿瘤定位超时 箭头点橙色色素c并增加自敏度d,结果与图像a和b相似
病人2是一个58岁人,左眼超时位分布式后台染色体颜色Fundus摄影FAF显示橙色色素和自敏度 金字塔1c, 1d)
检查两位病人的分片样本时,使用荧光显微镜显示自流率随RPE并存,与RPE细胞堆叠相匹配的频频区相匹配(RPE细胞堆叠)( 金字塔2b, 2c)并脱离Bruch薄膜ERP附带区可看到概述RPE位置的自流性(RPE) 微博2a)高塑性细胞并堆积局部视网膜隔离区(RPE内部最突出自流性细胞) 金字塔2b, 2c)易燃性似乎出自RPE粒子
图2
二号病人用染色体染色体从割左眼RPE显示 黄黄由自花素性质图像显示无肿瘤区RPE有正常线性模式并附BM原创放大x20对比之下,图像b显示组织渗透肿瘤细胞的地方RPE扩散上头 白星号表示从BM分队原创放大x20OS外段光受体T肿瘤细胞图像(c)放大式melonema视图 白箭头内反应RPE
图2
二号病人用染色体染色体从割左眼RPE显示 黄黄由自花素性质图像显示无肿瘤区RPE有正常线性模式并附BM原创放大x20对比之下,图像b显示组织渗透肿瘤细胞的地方RPE扩散上头 白星号表示从BM分队原创放大x20OS外段光受体T肿瘤细胞图像(c)放大式melonema视图 白箭头内反应RPE
使用H&E染色段,我们观察RPE细胞堆积并发生响应式修改 微博3)此外,H&E污点显示大型词只在视网膜与BM分离区子脉流中自由浮动 微博3a)与PAS相染的部分显示相似结果,spindle形状RPE细胞堆栈沿分治区组成多层RPE 金字塔4a, 4c)Imnothisto化学显示圆形细胞不是大型词组 微博4e)
图3
右眼病人一H&E染色体显示RPE覆盖染色体图像(a)具体显示视网膜分治区RPE反应式修改和直方细胞 黑箭头)!原创放大x200上头 左侧图像(b)显示有RPE反应式变化的人工视网膜分治 红色星号)对比中 右侧显示正常层RPE单元格 黑星号)!原创放大x200图像(c)显示RPEOS外段光受体SRF自动机流水T肿瘤细胞
图3
右眼病人一H&E染色体显示RPE覆盖染色体图像(a)具体显示视网膜分治区RPE反应式修改和直方细胞 黑箭头)!原创放大x200上头 左侧图像(b)显示有RPE反应式变化的人工视网膜分治 红色星号)对比中 右侧显示正常层RPE单元格 黑星号)!原创放大x200图像(c)显示RPEOS外段光受体SRF自动机流水T肿瘤细胞
图4
左眼2图像(a)是肿瘤质量段的PAS污点视网膜分队收集战略成果框架再者,反应式变化可见RPE特征,即细胞积分分插插原创放大x100图像(b)显示与图像(a)相同部分与KeratinOSCAR染色RPE细胞染色阳性原创放大x100图像(c,d)放大(x400分片分别与PAS和OSCARKeratin相联反应式RPE在这里也观察 黑星号高亮薄膜软素嵌入RPE细胞上头 红色星号表示drusen图像显示区spindle似phone类型RPE电池可清晰可见图像(e)原创放大度x400图像(f)使用反CD163抗体通过免疫史化学获取大型词组有强免疫表达法 黑箭头流体下浮对比中 金褐色嘴唇粒子存在于响应式RPE细胞内 黑星号)!原创放大度x400
图4
左眼2图像(a)是肿瘤质量段的PAS污点视网膜分队收集战略成果框架再者,反应式变化可见RPE特征,即细胞积分分插插原创放大x100图像(b)显示与图像(a)相同部分与KeratinOSCAR染色RPE细胞染色阳性原创放大x100图像(c,d)放大(x400分片分别与PAS和OSCARKeratin相联反应式RPE在这里也观察 黑星号高亮薄膜软素嵌入RPE细胞上头 红色星号表示drusen图像显示区spindle似phone类型RPE电池可清晰可见图像(e)原创放大度x400图像(f)使用反CD163抗体通过免疫史化学获取大型词组有强免疫表达法 黑箭头流体下浮对比中 金褐色嘴唇粒子存在于响应式RPE细胞内 黑星号)!原创放大度x400
同样的组织段使用免疫史化学分析免疫学结果汇总 表23.反CD163抗体在肿瘤质量大字中显示强免疫表达力,而反CD68抗体仅温和染色这些细胞 表2)两种抗体都沾染自由浮动大型词组 覆盖肿瘤质量的视网膜分治PAS污点帮助突出BM 微博4c)视网膜上皮细胞持续向OSCARKeratin、AE1/AE3和S-100保持正值 表2)虽然RPECAM5.2和Keratin7上也存在一定程度的免疫表达方式,但只在一些焦点区才出现这种方式,在这些中心区RPE细胞似有spindle形状!与肿瘤质效应和隔离区相关反应变化一致 表2)形细胞不与抗体对滑动肌肉发生反应(SMA),但对Vimentin有一定程度的阳性(Vimentin)(SMA) 表23)
表2
RPE覆盖小机器人梅兰诺马
表2
RPE覆盖小机器人梅兰诺马
RPE覆盖小机器人梅兰诺马
表2
并发
表2
并发
并发
表3
测试场对面 RPE的闪存结果
表3
测试场对面 RPE的闪存结果
测试场对面 RPE的闪存结果
表3
扩展式
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扩展式
扩展式
KeratinOSCAR染色这些RPE细胞并发生响应变化 金字塔4b, 4d, 4e)抗体对CD163确认子脉冲流体存在并允许我们辨别这些细胞与RPE细胞 微博4f)此外,对相同区域电子显微镜研究显示存在多组RPE细胞,实际含脂素素和melanoliposci素色素 微博5)
图5
电子显微镜RPE图像一显示一组RPE细胞 黑箭头并存多语法双叶林 黑粒子和嘴唇uscin 灰粒子可视觉化RPE细胞图像2显示RPE带mlanolipofscin粒子细胞 红箭头)
图5
电子显微镜RPE图像一显示一组RPE细胞 黑箭头并存多语法双叶林 黑粒子和嘴唇uscin 灰粒子可视觉化RPE细胞图像2显示RPE带mlanolipofscin粒子细胞 红箭头)
讨论
在这次研究中,我们发现斜橙色覆盖染色体源发源于多发性RPE细胞,内含单片liopuscin和melalioposcin粒子前科研究将橙色与大型词组和RPE细胞相联 6,11,18号,19号,23号色基摄影 FAF 免疫史化学 荧光显微镜 电子显微镜由于荧光色素性质,我们能够清晰视觉化它的确切位置当我们检查剖面标本时,全程RPE都观测到自发软素球最明显的领域RPE与BM分离分治区显示RPE细胞扩散,这些细胞阻塞并充斥双叶素素RPE沿肿瘤扩散 24码RPE细胞扩散覆盖肿瘤质量 直接关联到Fundus摄影所见橙色正像RPE细胞充斥着粒子唇片扩散并沿肿瘤堆积时,橙色色染色面积变得更为清晰
大型词法也和嘴语素相关联,但我们很少在荧光显微镜下观察到荧光直系细胞 25码其他人假设BM反常画大字类 24码这可能是为什么其他人沿着肿瘤观察巨语的原因,而不是因为这些细胞直接负责生产唇片素和橙色色此外,其他研究还确认常用宏标记CD68也可以出现在RPE细胞表面。 23号,26因此,如果单用这个标记,自流双叶素会被认为与大型词串相关联。
检验RPE细胞免疫史化学时,我们用CD163确认,大型字迹稀疏具体地说,大型词只在视网膜分治区周围流体中观察到浮动相形之下,RPE细胞与OSCARKeratin、AE1/AE3和S-100相联,并证实RPE细胞正在屏蔽荧光显微镜下观测到的自爆闪光球分治点的RPE细胞不染上上文提到的任何上皮标记。这可能是因为这些RPE细胞正经历响应式修改,导致对pheno类型作某些修改,可能类似于mesenchymal细胞Damato和Foulds描述这些变化 24码并称线性色素感知器 单层ERP细胞与BM相联化成圆形RPE细胞 堆积成多层细胞研究证实了他们的发现 RPE细胞进化成像Fiblasts 24码
这项研究受限出自缺少数据说明什么最可靠识别宏分词和RPE细胞最广泛的RPE细胞检测研究之一发现单克隆抗体CAM5.2对7和8Citoratin 27号然而,当我们用CAM5.2和cytokeratin7抗体检验组织切片时,RPE细胞不一致性上文已经提到,对于什么染色物最可靠检测大型词组也存在争议,文献中报告反CD68反体常用识别大型词组也可以检测RPE细胞 26模拟研究可能显示不同实验室的不同结果,这些实验室使用各种抗体克隆并因抗原检索技术的不同而异虽有这一限制,但我们相信橙色发源于扩散式RPE细胞,因为我们从免疫史化学中发现的结果与我们在荧光显微镜下观察到的结果一致。此外,自流橙色素或meliolipofscin粒子或RPE细胞内这两种色素无法从本项研究中确定
简言之,我们的数据显示,橙色染色圈覆盖色相间损耗源于RPE细胞而非宏构双叶素素和/或单叶素素素和相应的自爆率最为突出,RPE细胞覆盖肿瘤质量和离聚点BM扩散与橙色色最佳可视化
感知感知
部分由Paul家族和Deshong家族研究预防失明公司不受限制赠款支持
披露: M.D.加西亚州无; D.R.沙洛马无; 公元前马尔默斯坦无; J.S.浦里多,无
引用
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图1
颜色fundus照片(a,c)和FAF照片(b,d)图像(ab)取自病人1右眼肿瘤定位推理 箭头显示图像(a)上橙色色 箭头FAF图像(b)显示自敏度提高,这与用颜色Fundus摄像观察橙色的位置相关图像(c,d)取自2号病人左眼肿瘤定位超时 箭头点橙色色素c并增加自敏度d,结果与图像a和b相似
图1
颜色fundus照片(a,c)和FAF照片(b,d)图像(ab)取自病人1右眼肿瘤定位推理 箭头显示图像(a)上橙色色 箭头FAF图像(b)显示自敏度提高,这与用颜色Fundus摄像观察橙色的位置相关图像(c,d)取自2号病人左眼肿瘤定位超时 箭头点橙色色素c并增加自敏度d,结果与图像a和b相似
图2
二号病人用染色体染色体从割左眼RPE显示 黄黄由自花素性质图像显示无肿瘤区RPE有正常线性模式并附BM原创放大x20对比之下,图像b显示组织渗透肿瘤细胞的地方RPE扩散上头 白星号表示从BM分队原创放大x20OS外段光受体T肿瘤细胞图像(c)放大式melonema视图 白箭头内反应RPE
图2
二号病人用染色体染色体从割左眼RPE显示 黄黄由自花素性质图像显示无肿瘤区RPE有正常线性模式并附BM原创放大x20对比之下,图像b显示组织渗透肿瘤细胞的地方RPE扩散上头 白星号表示从BM分队原创放大x20OS外段光受体T肿瘤细胞图像(c)放大式melonema视图 白箭头内反应RPE
图3
右眼病人一H&E染色体显示RPE覆盖染色体图像(a)具体显示视网膜分治区RPE反应式修改和直方细胞 黑箭头)!原创放大x200上头 左侧图像(b)显示有RPE反应式变化的人工视网膜分治 红色星号)对比中 右侧显示正常层RPE单元格 黑星号)!原创放大x200图像(c)显示RPEOS外段光受体SRF自动机流水T肿瘤细胞
图3
右眼病人一H&E染色体显示RPE覆盖染色体图像(a)具体显示视网膜分治区RPE反应式修改和直方细胞 黑箭头)!原创放大x200上头 左侧图像(b)显示有RPE反应式变化的人工视网膜分治 红色星号)对比中 右侧显示正常层RPE单元格 黑星号)!原创放大x200图像(c)显示RPEOS外段光受体SRF自动机流水T肿瘤细胞
图4
左眼2图像(a)是肿瘤质量段的PAS污点视网膜分队收集战略成果框架再者,反应式变化可见RPE特征,即细胞积分分插插原创放大x100图像(b)显示与图像(a)相同部分与KeratinOSCAR染色RPE细胞染色阳性原创放大x100图像(c,d)放大(x400分片分别与PAS和OSCARKeratin相联反应式RPE在这里也观察 黑星号高亮薄膜软素嵌入RPE细胞上头 红色星号表示drusen图像显示区spindle似phone类型RPE电池可清晰可见图像(e)原创放大度x400图像(f)使用反CD163抗体通过免疫史化学获取大型词组有强免疫表达法 黑箭头流体下浮对比中 金褐色嘴唇粒子存在于响应式RPE细胞内 黑星号)!原创放大度x400
图4
左眼2图像(a)是肿瘤质量段的PAS污点视网膜分队收集战略成果框架再者,反应式变化可见RPE特征,即细胞积分分插插原创放大x100图像(b)显示与图像(a)相同部分与KeratinOSCAR染色RPE细胞染色阳性原创放大x100图像(c,d)放大(x400分片分别与PAS和OSCARKeratin相联反应式RPE在这里也观察 黑星号高亮薄膜软素嵌入RPE细胞上头 红色星号表示drusen图像显示区spindle似phone类型RPE电池可清晰可见图像(e)原创放大度x400图像(f)使用反CD163抗体通过免疫史化学获取大型词组有强免疫表达法 黑箭头流体下浮对比中 金褐色嘴唇粒子存在于响应式RPE细胞内 黑星号)!原创放大度x400
图5
电子显微镜RPE图像一显示一组RPE细胞 黑箭头并存多语法双叶林 黑粒子和嘴唇uscin 灰粒子可视觉化RPE细胞图像2显示RPE带mlanolipofscin粒子细胞 红箭头)
图5
电子显微镜RPE图像一显示一组RPE细胞 黑箭头并存多语法双叶林 黑粒子和嘴唇uscin 灰粒子可视觉化RPE细胞图像2显示RPE带mlanolipofscin粒子细胞 红箭头)
表1
immunioto化学研究使用原生抗体
表1
immunioto化学研究使用原生抗体
immunioto化学研究使用原生抗体
表2
RPE覆盖小机器人梅兰诺马
表2
RPE覆盖小机器人梅兰诺马
RPE覆盖小机器人梅兰诺马
表2
并发
表2
并发
并发
表3
测试场对面 RPE的闪存结果
表3
测试场对面 RPE的闪存结果
测试场对面 RPE的闪存结果
表3
扩展式
表3
扩展式
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